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DNA退火缓冲液(5×)

DNA退火缓冲液(5×)

简要描述:DNA退火缓冲液(5×),是一种可用于DNA oligo退火的缓冲液,可用于常规的DNA oligo的退火,尤其适合于较难退火的用于RNAi (也称siRNA)质粒构建的DNA oligo的退火。由于RNAi质粒构建的DNA oligo通常由于含有约20个左右的互补序列,自身易形成发夹结构,从而影响两条DNA

产品型号: R21943

所属分类:通用Buffer

更新时间:2021-11-18

厂商性质:生产厂家

详情介绍

DNA退火缓冲液(5×)

产品货号:R21943

产品包装:1ml/5ml

产品简介:

DNA寡核苷酸退火缓冲液(Annealing Buffer for DNA Oligos)简称为DNA退火缓冲液,是一种可用于DNA oligo退火的缓冲液,可用于常规的DNA oligo的退火,尤其适合于较难退火的用于RNAi (也称siRNA)质粒构建的DNA oligo的退火。由于RNAi质粒构建的DNA oligo通常由于含有约20个左右的互补序列,自身易形成发夹结构,从而影响两条DNA oligo的正确退火。

尚宝生物 Annealing Buffer for DNA Oligos(5×)能有效避免DNA oligo自身形成发夹结构,并且两条oligo退火后可以直接和经酶切、纯化的质粒连接,转化后可以得到大量的阳性克隆。该本试剂操作简单,只需把待退火的DNA oligoAnnealing Buffer for DNAOligos(5×)按照一定比例混合后,置于PCR仪上进行程序降温,约90min即可完成。

产品组成:    

试剂名称

规格

保存温度

试剂(A): Annealing Buffer for DNAOligos(5×)

1ml

-20℃

试剂(B): Nuclease-Free Water

5ml

室温

操作步骤(仅供参考)

1.  把待退火的DNA oligo 用经灭菌的超纯水或 Nuclease-Free Water 配制成 50μM,同

时溶解 Annealing Buffer for DNA Oligos(5×),混匀备用。

2.  按如下退火反应体系操作:

Nuclease-Free Water

Tatal4

Annealing Buffer for DNA

0μl

Oligos(5×)

20μl

DNA oligo A(50μM)

20μl

DNA oligo B(50μM)

20μl

按照上述顺序,依次加入并混匀,如果所用 PCR 仪没有加热盖,可加入 Mineral Oil 防止

液体挥发。

3.  按如下 PCR 仪的退火条件:

步骤

温度

时间

作用

1

95℃

2min

Oligo充分变性

2

90s下降1℃降至25℃

90min

程序退火

3

4℃

长期保存

暂时存放

4.  退火后可直接用于连接反应,也可以-20℃冻存备用。如果退火结束后打算进行酶切等

其它反应,最好用纯化试剂盒进行纯化,或者确保退火产物在反应体系中体积不超过 5%

以避免 Annealing Buffer 对后续的酶反应体系的干扰。

注意事项:

1. 避免反复冻融,以免效率下降。

2. 该试剂只适合于DNA oligo的退火,不适用于RNA oligo的退火。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件:

-20℃12个月有效。

 




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