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细胞色素氧化酶染色液(联苯胺法)

细胞色素氧化酶染色液(联苯胺法)

简要描述:细胞色素氧化酶染色液(联苯胺法)被认为是线粒体膜固有的酶,在含有大量线粒体的细胞(如心肌、肾小管上皮以及胃壁细胞、肝细胞)内都具有高度活性。此酶活性往往作为细胞内氧化代谢的指标,亦作为线粒体的标志酶之一。

产品型号: R22034-4×50

所属分类:缓冲液

更新时间:2021-09-15

厂商性质:生产厂家

详情介绍

细胞色素氧化酶染色液(联苯胺法)

产品货号:R22034

产品规格:4×50ml

产品简介:

细胞色素氧化酶(Cytochrome OxidaseCO)被认为是线粒体膜固有的酶,在含有大量线粒体的细胞(如心肌、肾小管上皮以及胃壁细胞、肝细胞)内都具有高度活性。此酶活性往往作为细胞内氧化代谢的指标,亦作为线粒体的标志酶之一。

尚宝生物 细胞色素氧化酶染色液(联苯胺法)染色原理是细胞色素氧化酶催化3,3-二氨基联苯胺(DAB)使其侧链的氨基氧化,进行反复的氧化性聚合和氧化性环化形成不溶性的棕色Phenazine聚合物。此酶对固定剂敏感,故须用新鲜切片。

产品组成

试剂名称

4×50ml

保存条件

试剂(A): CO清除液

2×50ml

4℃,避光

试剂(B): B1: DAB染色液

45ml

-20℃,避光

DAB孵育液 B2: DAB增强剂

5ml

室温

B3: DAB反应液

100ul

室温

B1:B2:B3=9000:1000:3混合,即为DAB孵育液,即配即用。

试剂(C): Lea苏木素染色液

50ml

4℃,避光

试剂(D): CO对照液

1ml

室温

自备材料:

恒温培养箱和光学显微镜。

操作步骤:

1. 冰冻切片,厚6μm,不固定。

2. 滴加CO清除液于切片上,铺满整个样品表面。

3. 切片入DAB孵育液中,37℃避光孵育4560min

4. 移去切片上的染色液,滴加CO清除液于切片上,铺满整个样品表面。

5. 蒸馏水稍洗35s

6. (可选)滴加Lea苏木素染色液浅染细胞核35min

7. 流水冲洗10min。常规脱蜡透明,中性树胶封固。

染色结果:

 CO 酶活性部位                   棕色

心肌、肾小管上皮内颗粒(线粒体)    蓝色

阴性对照(可选)

取新鲜配制好的DAB孵育液,按DAB孵育液:CO对照液=50:1的比例混合,即为CO对照工作液。相同切片入CO对照工作液,室温孵育3060min,其余同上,呈阴性反应。

注意事项:

1. 本染色液适用于冰冻切片,同时应减少切片在室温暴露的时间。

2. CO孵育液孵育时间因组织而异,心肌、肾孵育约2030min,肝脏约5060min,甲状腺滤泡上皮约2h

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期:6个月有效。

 




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