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乙酰胆碱酯酶染色液(铅铜硫胆碱法)

乙酰胆碱酯酶染色液(铅铜硫胆碱法)

简要描述:乙酰胆碱酯酶染色液(铅铜硫胆碱法)
胆碱酯酶(cholinesterase)属于特异性酯酶,可分为两大类。一类是乙酰胆碱酯酶(Acetyl cholinesterase,AChE)又称为真性胆碱酯酶,能水解乙酰胆碱,起到生理的调节作用;另一类为胆碱酯酶,又称假性胆碱酯酶(Pseudo cholinesterase,PsChE),

产品型号: R23227

所属分类:常规溶液

更新时间:2021-09-14

厂商性质:生产厂家

详情介绍

乙酰胆碱酯酶染色液(铅铜硫胆碱法)

目录编号:R23227

 

产品规格:3×20ml

 

产品简介:

胆碱酯酶(cholinesterase)属于特异性酯酶,可分为两大类。一类是乙酰胆碱酯酶(Acetyl cholinesteraseAChE)又称为真性胆碱酯酶,能水解乙酰胆碱,起到生理的调节作用;另一类为胆碱酯酶,又称假性胆碱酯酶(Pseudo cholinesterasePsChE),能水解胆碱的酯而不能水解乙酰胆碱酯。乙酰胆碱酯酶主要存在于神经元的胞质内、神经与肌肉接头处即所谓运动终板处;PsChE主要存在于血浆、胰腺、唾液腺内,生理功能尚不明确。显示乙酰胆碱酯酶的方法有Koell法、SnellGarrett法、KarnovskyRoots法等。

乙酰胆碱酯酶染色液(铅铜硫胆碱法)染色原理是乙酰胆碱酯酶水解碘化乙酰硫代胆碱,释放乙酸和硫代胆碱,磷酸盐与铅离子形成磷酸铅沉淀,再被S2+置换,形成硫化铅沉淀。其优点是操作简便、酯酶的扩散较少,其缺点是对底物对组织的渗透性较差,有可能出现假阳性。

 

产品组成:

产品组成

3×20ml

保存温度

试剂(A):AChE孵育液  A1AChE Iodide

48mg

4,避光

试剂(A):AChE孵育液  A2AChE Buffer A

2.04ml

室温

试剂(A):AChE孵育液  A3AChE Buffer B

4.08ml

4,避光

试剂(A):AChE孵育液  A4AChE Buffer C

4.08ml

4,避光

试剂(A):AChE孵育液  A5Iso-OMPA

10.2ml

-20,避光

试剂(B):AChE漂洗液

2×20ml

室温

试剂(C):AChE硫化液

2×1ml

室温,避光

自备材料:

1.        10%甲醛钙固定液 

2.        恒温培养箱 

3.        光学显微镜

 

操作步骤:(仅供参考)

1.        冰冻切片,6μm,不固定或置于遇冷的10%甲醛钙固定。

2.        蒸馏水洗。

3.        临用前,将A1A2A3A4A5完全混合,即为A12混合液,3小时内使用。

4.        切片入预温的AChE孵育液中,避光孵育 (一般不超过70min)

5.        蒸馏水洗,镜下观察如活性部位仍较淡,可于蒸馏水洗后再进行孵育,至反应合适为止。

6.        AChE漂洗液充分漂洗,如AChE漂洗液用量过大,可用PBS代替。

7.        在上述过程中配制ALP硫化工作液,即取适量的试剂(C)用蒸馏水或者去离子水稀释, 即为ALP硫化工作液,即配即用。切片入ALP硫化工作液,孵育。

8.        流水冲洗。甘油明胶封固。

 

染色结果:

AChE酶活性部位

棕黑色

细胞核

蓝色

 

 阴性对照(可选)

取配制好的AChE孵育液,按AChE孵育液: AChE-ChE抑制剂充分混合。取相同切片入含AChE-ChE抑制剂的AChE孵育液中,其余同上,呈阴性反应。  

 

注意事项:

1.        本染色液适用于冰冻切片,同时应减少切片在室温暴露的时间。

2.        为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

有效期:6个月有效。

 




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