乙酰胆碱酯酶染色液（铅铜硫胆碱法）

乙酰胆碱酯酶染色液（铅铜硫胆碱法）

目录编号：R23227

产品规格：3×20ml

产品简介：

胆碱酯酶(cholinesterase)属于特异性酯酶，可分为两大类。一类是乙酰胆碱酯酶(Acetyl cholinesterase，AChE)又称为真性胆碱酯酶，能水解乙酰胆碱，起到生理的调节作用；另一类为胆碱酯酶，又称假性胆碱酯酶(Pseudo cholinesterase，PsChE)，能水解胆碱的酯而不能水解乙酰胆碱酯。乙酰胆碱酯酶主要存在于神经元的胞质内、神经与肌肉接头处即所谓运动终板处；PsChE主要存在于血浆、胰腺、唾液腺内，生理功能尚不明确。显示乙酰胆碱酯酶的方法有Koell法、Snell和Garrett法、Karnovsky和Roots法等。 

乙酰胆碱酯酶染色液(铅铜硫胆碱法)染色原理是乙酰胆碱酯酶水解碘化乙酰硫代胆碱，释放乙酸和硫代胆碱，磷酸盐与铅离子形成磷酸铅沉淀，再被S2+置换，形成硫化铅沉淀。其优点是操作简便、酯酶的扩散较少，其缺点是对底物对组织的渗透性较差，有可能出现假阳性。

产品组成：

自备材料：

1.        10%甲醛钙固定液 

2.        恒温培养箱 

3.        光学显微镜

操作步骤：（仅供参考）

1.        冰冻切片，6μm，不固定或置于遇冷的10%甲醛钙固定。

2.        蒸馏水洗。

3.        临用前，将A1、A2、A3、A4、A5完全混合，即为A12混合液，3小时内使用。 

4.        切片入预温的AChE孵育液中，避光孵育 (一般不超过70min)。 

5.        蒸馏水洗，镜下观察如活性部位仍较淡，可于蒸馏水洗后再进行孵育，至反应合适为止。 

6.        入AChE漂洗液充分漂洗，如AChE漂洗液用量过大，可用PBS代替。 

7.        在上述过程中配制ALP硫化工作液，即取适量的试剂(C)用蒸馏水或者去离子水稀释, 即为ALP硫化工作液，即配即用。切片入ALP硫化工作液，孵育。 

8.        流水冲洗。甘油明胶封固。

染色结果：

 阴性对照(可选)： 

取配制好的AChE孵育液，按AChE孵育液: AChE-ChE抑制剂充分混合。取相同切片入含AChE-ChE抑制剂的AChE孵育液中，其余同上，呈阴性反应。  

注意事项： 

1.        本染色液适用于冰冻切片，同时应减少切片在室温暴露的时间。 

2.        为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：6个月有效。