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酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)

酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)

简要描述:酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE法)
酯酶主要分为非特异性酯酶(non-specific esterase)、酯酶(lipase)、胆碱酯酶(choli-esterase)。每一种酯酶常能水解许多不同的底物,多种不同的酯酶又能水解相同的底物,因此这一系列酯酶被称为非特异性酯酶。

产品型号: R22036

所属分类:缓冲液

更新时间:2021-09-08

厂商性质:生产厂家

详情介绍

酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE)

 

产品货号:R22036

 

产品规格:3×10ml/3×20ml

 

产品简介:

酯酶主要分为非特异性酯酶(non-specific esterase)、酯酶(lipase)、胆碱酯酶(choli-esterase)。每一种酯酶常能水解许多不同的底物,多种不同的酯酶又能水解相同的底物,因此这一系列酯酶被称为非特异性酯酶。非特异性酯酶的最适pH5.08.0,定位于溶酶体和内质网,在肝脏、肾脏、胰和小肠具有较高的酶活性。单核-吞噬细胞系统的单核巨噬细胞、树突细胞也含有丰富的非特异性酯酶。

尚宝生物 酸性α-乙酸萘酚酯酶染色液(ANAE)又称非特异性酯酶染色液,其原理是酸性条件下细胞中的酸性酯酶将α-乙酸萘酚水解产生α-萘酚,α-萘酚再与六偶氮副品红偶联,生成不溶性红色沉淀,定位于细胞质。本染色液对酯酶染色无特异性,故又称作非特异性酯酶染色液,可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片的非特异性酯酶染色,亦可作氟化钠抑制试验。该染色液仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。

 

产品组成:

试剂名称

3×10ml

3×20ml

保存条件

试剂(A): ANAE固定液

10ml

20ml

室温,避光

试剂(B): B1: Pararosaniline solution

0.05ml

0.1ml

4℃,避光

ANAE B2:   Nitrite solution

0.05ml

0.1ml

4℃,避光

孵育液B3: α-NAE solution

0.5ml

1ml

4℃,避光

B4: ANAE   buffer

9.5ml

19ml

室温

临用前,按B1:B2:B3:B4=1:1:10:190充分混合,即为ANAE孵育液,即配即

用。注意应先B1:B2=1:1混匀后,再与B3B4混匀。

试剂(C): 甲基绿染色液

10ml

20ml

室温,避光

试剂(D): NaF solution

0.2ml

0.4ml

室温,避光

 

自备材料:

载玻片、湿盒和显微镜。

 

操作步骤:

1.        血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切入ANAE固定液固定1015min

2.        水洗5min

3.        入配制好的ANAE孵育液,放入湿盒中,室温(1525℃)避光孵育1h,水洗。

4.        入甲基绿染色液复染515min,水洗,镜检。

 

染色结果:

细胞质            暗红色/棕色

细胞核            绿色

 

氟化钠抑制实验:

NaF solutionANAE孵育液=125的比例,在ANAE孵育液中加入NaF solution,其余按上述染色法进行。

 

注意事项:

1.        血液或骨髓细胞涂片应新鲜,薄厚适宜,一般2天内染色,否则会影响酶的活性。

2.        ANAE孵育液易失效或降低阳性强度,即配即用,不宜久置。

3.        ANAE孵育液配制后易出现浑浊,但不会影响染色效果。

4.        单核细胞为中度阳性至强阳性,对NaF敏感。正常粒细胞呈阴性反应。

5.        每次染色时,应有阳性对照片。

6.        为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

有效期: 6个月有效。

 

 




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