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六胺银染色液(改良Grocott-橙黄G法)

六胺银染色液(改良Grocott-橙黄G法)

简要描述:六胺银染色液(改良Grocott-橙黄G法)六胺银染色液是一种经典显示基底膜的方法。经过Grocott改良之后,组织经铬酸氧化,使真菌内的黏多糖暴露出醛基,醛基把六胺银还原为黑色的金属银。

产品型号: M20150

所属分类:缓冲液

更新时间:2021-09-03

厂商性质:生产厂家

详情介绍

六胺银染色液(改良Grocott-橙黄G法)

产品货号:M20150

 

产品规格:6×50ml/6×100ml

 

产品简介:

六胺银染色液是一种经典显示基底膜的方法。经过Grocott改良之后,组织经铬酸氧化,使真菌内的黏多糖暴露出醛基,醛基把六胺银还原为黑色的金属银。氯化金可使金属银转变为更稳定的金属金,同时使背景更清晰。海波可以固定并洗去未还原的银离子。

本法采用橙黄G复染对各种真菌的显示效果都很好,特别是马尔尼菲青霉菌的显示特别好,但必须淡染橙黄G。如需显示曲霉和白色念珠菌,可选用苏木素或者伊红复染,可看到真菌与周围组织的关系。

 

产品组成:

产品名称

5×50ml

5×100ml

保存条件

试剂(A):氧化剂

50ml

100ml

室温,避光

试剂(B):漂白剂

50ml

100ml

室温

试剂(C):

六胺银工作液

C1:六胺银原液

25ml

50ml

4℃,避光

C2:硼酸钠溶液

25ml

50ml

室温

临用前,C1C2等量混合即为六胺银工作液,即配即用。

试剂(D):氯化金溶液

50ml

100ml

4℃,避光

试剂(E):海波溶液

50ml

100ml

室温

试剂(F):橙黄G复染液

50ml

100ml

室温

 

操作步骤(仅供参考):

1. 组织固定于甲醛固定液中,常规脱水包埋。切4um,脱蜡至水洗。

2. 切片入氧化剂氧化20min。流水稍洗。

3. 入漂白液处理1min,以除去氧化剂。

4. 流水冲洗5min,蒸馏水浸洗2次,每次30s-60s

5. 切片放入配制好的预热至60℃的六胺银工作液中,加盖60℃恒温染色大约2060min,切片呈淡黄色即取出经水洗后显微镜观察有否有菌体出现。如有淡棕色菌体出现,应每隔5-10min观察一次以控制菌体着色深浅,直至显色理想。

6. 入蒸馏水中清洗。

7. 用氯化金溶液调色12min。蒸馏水洗12min

8. 置于海波溶液2min。流水冲洗5min

9. 滴加橙黄G一小滴复染1s即用水冲洗。染色时间不能过长,否则将影响最终效果。

10. 流水冲洗20s-60s

11. 常规脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。

真菌、上皮粘液

黑色或棕黑色

背景

橙黄色

 

染色结果:

 

 

注意事项:

1. 实验中所用玻璃器皿,应预先用硫酸洗液浸泡并用蒸馏水冲洗干净,烤干。

2. 六胺银工作液配制后应先放入温箱中预热,温度要达到60℃时,再放人切片进行染色。如用水浴锅代替恒温箱,需将温度设定在48-50摄氏度,否则切片会很快变黑而难以掌握。一般建议在恒温箱中孵育染色。

3. 在低倍镜检时,菌体不宜着色太黑,否则在高倍镜下观察则不够清晰透亮,特别需注意菌体成堆的地方的显色。配制好的六胺银工作液是一次性的,不能久放。

4. 氯化金调色时,一定要在显微镜下观察。

5. 橙黄G一定要淡染,时间不能过长。

6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件4℃,避光6个月



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