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六胺银染色液(改良Grocott-苏木素法)

六胺银染色液(改良Grocott-苏木素法)

简要描述:六胺银染色液(改良Grocott-苏木素法)六胺银染色液是一种经典显示基底膜的方法。经过Grocott改良之后,组织经铬酸氧化,使真菌内的黏多糖暴露出醛基,醛基把六胺银还原为黑色的金属银。氯化金可使金属银转变为更稳定的金属金,同时使背景更清晰。海波可以固定并洗去未还原的银离子。

产品型号: M20151

所属分类:缓冲液

更新时间:2021-09-03

厂商性质:生产厂家

详情介绍

六胺银染色液(改良Grocott-苏木素法)

产品货号:M20151

 

产品规格:6×50ml/6×100ml

 

产品简介:

六胺银染色液是一种经典显示基底膜的方法。经过Grocott改良之后,组织经铬酸氧化,使真菌内的黏多糖暴露出醛基,醛基把六胺银还原为黑色的金属银。氯化金可使金属银转变为更稳定的金属金,同时使背景更清晰。海波可以固定并洗去未还原的银离子。

本法采用苏木素复染(也可根据需要自行添加伊红对染),对卡氏肺囊虫、曲霉和白色念珠菌的显示效果很好,可看到囊虫或真菌与周围组织的关系。本产品仅用于科研领域,不得用于临床诊断或其他用途。

 

产品组成:

产品名称

6×50ml

6×100ml

保存条件

试剂(A):氧化剂

50ml

100ml

室温,避光

试剂(B):漂白剂

50ml

100ml

室温

试剂(C):

六胺银工作液

C1:银溶液

1.5ml

3ml

4℃,避光

C2:六胺溶液

25ml

50ml

4℃,避光

C3:硼砂溶液

25ml

50ml

室温

C1C2C3按操作说明混合配制。

试剂(D):氯化金溶液

50ml

100ml

4℃,避光

试剂(E):海波溶液

50ml

100ml

室温

试剂(F):苏木素复染液

50ml

100ml

4

 

自备材料:

1. 蒸馏水、系列乙醇、封片剂

2. 水浴锅或恒温箱

3. 环保浸蜡脱蜡透明液或二甲苯

 

操作步骤(仅供参考):

1. 组织固定于甲醛固定液中,常规脱水包埋,切片4~5μm,脱蜡至水洗。

2. 切片入氧化剂氧化20min,流水稍洗。

3. 入漂白剂处理1min,以除去氧化剂

4. 流水冲洗5min,蒸馏水浸洗2次,每次30~60s

5. 配制六胺银贮备液:银溶液:六胺溶液=6:100混合即成,会有少量沉淀产生,充分溶解即可。4℃保存,3个月有效。

6. 配制六胺银工作液:六胺银贮备液:硼砂溶液=106:100混合,六胺银工作液是一次性的,不能久放。配制后可放入60℃温箱中预热30min,再放人切片进行染色。

7. 切片放入配制好的预热至60℃六胺银工作液中,加盖60℃恒温染色2060min,切片呈淡黄色即可取出,经水洗后显微镜观察是否有菌体出现。如有淡棕色菌体出现,应每隔5~10min观察1次以控制菌体着色深浅,直至显色理想。

8. 入蒸馏水中清洗。

9. 用氯化金溶液调色12min,蒸馏水洗20~40s

10. 置于海波溶液2min,流水冲洗5min

11. 滴加苏木素复染液染色5~10min,流水冲洗5~10min

12. 常规脱水,二甲苯或环保浸蜡脱蜡透明液透明,中性树胶封固。

 

真菌、上皮粘液、卡氏肺囊虫包囊壁

黑色或棕黑色

染色结果:

 

 

注意事项:

1. 实验中所用玻璃器皿,应预先用硫酸洗液浸泡并用蒸馏水冲洗干净、烤干。

2. 六胺银储备液可4℃保存,3个月有效。

3. 配制好的六胺银工作液是一次性的,不宜久置。

4. 六胺银工作液配制后应先放入温箱中预热,温度要达到60℃时,再放人切片进行染色;如用水浴锅代替恒温箱,需将温度设定在48~50℃,否则切片会很快变黑而难以掌握,一般建议在恒温箱中孵育染色。

5. 在低倍镜检时菌体不宜着色太黑,否则在高倍镜下观察则不够清晰透亮,特别需注意菌体成堆的地方的显色。

6. 氯化金调色时一定要在显微镜下观察。

7. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件4℃,避光6个月



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