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Heidenhain铁苏木素染色液

Heidenhain铁苏木素染色液

简要描述:Heidenhain铁苏木素染色液
苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色,是病理学和组织学常用的一种染色方法。苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易不带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。

产品型号: R21846

所属分类:缓冲液

更新时间:2021-08-11

厂商性质:生产厂家

详情介绍

Heidenhain 铁苏木素染色液

产品货号:R21846

 

产品规格:2×100ml

 

产品简介:

苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色,是病理学和组织学常用的一种染色方法。苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易不带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。

Heidenhain铁苏木素染色液以硫酸铁铵作为氧化剂和分化剂,根据不同的分化程度可显示不同的结构。染色后所有成分均为黑色或深灰黑色,不同组织结构的苏木素着色可被Heidenhain 分化液以不同的速度进行性褪去,黑色褪去顺序依次为:线粒体、横纹肌、核染色质。

 

染色原理:

1、 细胞核染色的原理:

苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易不带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。

2、 细胞胞浆染色的原理:

伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色不染液的pH值密切相关。当染色液pH值在胞浆蛋白质等电点(4.75.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,不胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。

3、 分化作用:

染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在HE染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织不色素分离而退色。大多数组织经苏木素染色后,必须用1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核不细胞浆染色的分明。

4、 返蓝作用:

分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色,立即用水除去组织切片上的酸而中止分化,再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝,但所需时间较长。

 

包装清单:

产品名称

2×100ml

储存条件

试剂(A): Heidenhain Differentiation

100ml

室温,避光

试剂(B): Heidenhain 铁苏木素染色液

100ml

室温,避光

 

操作步骤:

1.  切片脱蜡至水

①二甲苯作用2次,每次510min

(可选)无水乙醇作用2次,每次35min

95%的乙醇                    3~5min

④90%的乙醇                    3~5min

⑤80%的乙醇                    35min

自来水或蒸馏水冲洗            13min

2.  染色

①Heidenhain Differentiation媒染    1h (见注意事项1)

蒸馏水冲洗                     510s (见注意事项1)

③Heidenhain铁苏木素染色液染色   1h

自来水冲洗                     2030s

⑤Heidenhain Differentiation分化或用蒸馏水1:1稀释Heidenhain Differentiation分化,并不自来水冲洗交替进行,显微镜下观察分化程度。(见注意事项2)

自来水冲洗                     10min

染色结果:线粒体、横纹肌、髓磷脂、染色质等呈灰黑色。

 

注意事项:

1.        Heidenhain Differentiation媒染时间和Heidenhain铁苏木素染色液染色时间根据不同的固定液而异。一般情况下,媒染和染色时间控制在1h即可,参考时间为:福尔马林、Bouin固定液、Carnoy固定液1hHellyZenker等重铬酸盐固定液3h,si氧化锇Flemming 固定液 24h

2.        显微镜下控制分化程度,直到出现所需观察的结构。若分化过度,可用苏木素重染相同时间并重新分化。亦可用蒸馏水2:1 稀释Heidenhain Differentiation后再进行分化,以便更好控制分化程度。

3.        切片分化后应彻底冲洗洗掉所有分化液,组织不易褪色。

4.        胞浆复染(伊红或橙黄G)可突出核染色质,尤其在显示染色体或有丝分裂更有效。

5.        切片脱蜡应尽量干净。

6.        系列乙醇应经常更换新液。

7.        冷冻切片染色时间尽量要短。

8.        为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件:24个月有效。




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