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Ehrlich苏木素染色液

Ehrlich苏木素染色液

简要描述:Ehrlich苏木素染色液
苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色,是病理学和组织学常用的一种染色方法。苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易不带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。

产品型号: R21872

所属分类:缓冲液

更新时间:2021-07-29

厂商性质:生产厂家

详情介绍

Ehrlich苏木素染色液

产品货号:R21872

产品规格:100ml/500ml

产品简介:

苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色,是病理学和组织学常用的一种染色方法。苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易不带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素成熟的方法有自然氧化法、化学氧化法。自然氧化是指暴露于光和空气中,这个过程比较缓慢,约需36个月不等,但生成物染色能力可维持很长时间。EhrlichDelafield苏木素就属于这种。Ehrlich苏木素作为一种良好的核染色液,也可用于黏蛋白染色如软骨的黏液多糖,骨和软骨的染色也推荐使用 Ehrlich苏木素染液。

尚宝生物Ehrlich苏木素染液非常稳定,成熟后密封可保存2年。对核染色质染得很清晰细致,染色时间也稍长,约1520min。适用于教学和科研上的制片染色,用此染色液对冷冻切片染色则不理想。

染色结果:

1、细胞核染色的原理:

苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使 DNA 双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。

2、细胞胞浆染色的原理:

伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的pH值密切相关。当染色液pH值在胞浆蛋白质等电点(4.75.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。

3、分化作用:

染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在HE染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织与色素分离而退色。大多数组织经苏木素染色后,必须用1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。

4、返蓝作用:

分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色,立即用水除去组织切片上的酸而中止分化,再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝,但所需时间较长。

产品组成:

产品名称

规格

储存条件

Ehrlich   苏木素染色液

100ml/500ml

室温,避光

自备材料:

1.        盐酸乙醇分化液

2.        蓝化液,如稀氨水、碳酸锂溶液等

3.        系列乙醇

4.        伊红染色液

 

5.        4%多聚甲醛

操作步骤:

(一)切片脱蜡至水

1.  切片脱蜡至水

二甲苯作用2次,每次510min

②(可选)无水乙醇作用2次,每次3~5min

③95%的乙醇                  3~5min

④90%的乙醇                  3~5min

⑤80%的乙醇                  3~5min

自来水或蒸馏水冲洗          1~3min

2.  染色

①Ehrlich苏木素染色液染色      15~20min

自来水或蒸馏水冲洗           5~10s

(可选)盐酸乙醇分化         2~5s

自来水冲洗                   20~30s

⑤(可选)蓝化液返蓝           20~40s

⑥自来水冲洗                   30~60s

⑦伊红染色液染色                3~5min

⑧自来水冲洗                    1~5s

3.  脱水、透明、封固

①80%乙醇                     1020s

②90%乙醇                     1020s

③95%乙醇作用2次,每次12min

无水乙醇作用2次,每次23min

二甲苯透明3次,每次23min

中性树脂封片。

染色结果:细胞核呈蓝色;细胞质、肌纤维、胶原纤维等呈深浅不一的红色;角蛋白、红细胞等呈明亮的橙红色。

(二)细胞染色

1.        4%多聚甲醛固定1020min

2.        自来水冲洗2次,每次2min

3.        蒸馏水冲洗2次,每次2min

4.        染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤,作用时间应相应缩短。

染色结果:细胞核呈蓝色;细胞质、纤维呈红色。

注意事项:

1.        切片脱蜡应尽量干净。系列乙醇应经常更换新液。

2.        盐酸乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织类别以及新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够,以便彻底清洗酸。

3.        蓝化液常使用0.21%氨水或Scott促蓝液或0.11%碳酸锂溶液。

4.        为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期:24个月有效。




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