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吖啶橙染色液(1mg/ml)

吖啶橙染色液(1mg/ml)

简要描述:吖啶橙(Acridine Orange,AO)属于三环杂芳香燃料,可以标记DNA、RNA,属于异染性荧光染料。该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA核RNA染色。因此AO常用于细胞内DNA和RNA进行检测。AO与核酸结合方式主要有:1、插入性结合,AO嵌入核酸双链的碱基对之间,这种结合方式主要为AO与DNA的结合,其荧光发射峰为530nm,激发后呈绿色荧光;2、静电吸引,带正电荷的AO与单链

产品型号: R21420

所属分类:缓冲液

更新时间:2021-11-22

厂商性质:生产厂家

详情介绍

吖啶橙染色液(1mg/ml

产品货号:R21420                                              

产品包装:10ml/50ml

产品简介:

吖啶橙(Acridine OrangeAO)属于三环杂芳香燃料,可以标记DNARNA,属于异染性荧光染料。该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNARNA染色。因此AO常用于细胞内DNARNA进行检测。AO与核酸结合方式主要有:1、插入性结合,AO嵌入核酸双链的碱基对之间,这种结合方式主要为AODNA的结合,其荧光发射峰为530nm,激发后呈绿色荧光;2、静电吸引,带正电荷的AO与单链核酸的磷酸根(带负电荷)产生静电间的吸引结合,这种结合方式主要为AORNA的结合,其荧光发射峰为640nm,激发后呈红色荧光,少量结合会呈桔黄色或桔红色荧光。因此,吖啶橙嵌合到双链DNA分子中显绿色,与DNA单链或RNA结合时发桔黄色或橙红色荧光。

尚宝生物吖啶橙染色液(1mg/ml)为储存液,使用时应稀释到合适浓度后使用。染色后在荧光显微镜下观察,吖啶橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片段,形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光或黄绿色碎片颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。吖啶橙染色常与EB染色合用双染,因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。

产品组成:

试剂名称

规格

保存条件

Acridine Orange Stain1mg/ml

10ml

2-8℃

自备材料:

1.        荧光显微镜

2.        低速离心机

3.        PBS

4.        细胞计数板

5.       载玻片、盖玻片

操作步骤(仅供参考):

1.        收集细胞(采用流式细胞仪检测时,应先固定细胞),用PBS清洗细胞1次,计数并调节细胞浓度至106/ml

2.        取适量的细胞悬液,加入Acridine Orange Stain1mg/ml),使AO终浓度为8.5-17μg/ml,轻轻混匀;

3.        室温避光染色15-20min,滴加于载玻片上并加盖玻片或上流式细胞仪分析;

4.        荧光显微镜下观察(激发滤光片波长488nm,阻断滤光片波长515nm),计数并拍照。

染色结果:

正常细胞: 细胞被均匀染成黄绿色荧光。

凋亡细胞: 染色质浓缩,细胞核碎裂成点状,被染成大小不一、致密浓染的绿色颗粒。

注意事项:

1.        Acridine Orange Stain1mg/ml)不含破膜剂,较少单独使用。

2.        吖啶橙染色常与EB染色合用,可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。

3.        如有低温离心机进行离心效果更佳。

4.        操作过程中应注意减少试剂暴露于强光下的时间。

5.        试剂有一定毒性,请小心操作。

6.        为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件:

避光, 6个月有效。

 



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