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微丝染色液(R250法)(试剂盒)

微丝染色液(R250法)(试剂盒)

简要描述:微丝染色液(R250法).细胞骨架一般是指真核细胞胞质中纵横交错的纤维网,观察细胞骨架的方法有电镜、组织化学、酶标记、免疫荧光等。微丝(microfilament)是由肌动蛋白构成的纤维,微丝在不同种类的细胞中与某些结合蛋白一起形成不同的亚细胞结构(如肌肉细丝、肠上皮微绒毛轴心、应力纤维等)。

产品型号: R21851

所属分类:染色试剂盒

更新时间:2021-11-22

厂商性质:生产厂家

详情介绍
  微丝染色液(R250 法)
 
  产品货号:R21851
 
  产品规格:5×50ml
 
  产品简介: 细胞骨架一般是指真核细胞胞质中纵横交错的纤维网,观察细胞骨架的方法有电镜、组织化学、酶标记、免 疫荧光等。微丝(microfilament)是由肌动蛋白构成的纤维,微丝在不同种类的细胞中与某些结合蛋白一起形成不 同的亚细胞结构(如肌肉细丝、肠上皮微绒毛轴心、应力纤维等)。 尚宝生物微丝染色液(R250 法)主要显示由微丝构成的应力纤维,由于细胞对细胞基质的附着和维持扁平铺展 的形状,该纤维在体外培养的贴壁细胞中尤其发达。考马斯亮蓝 R250 染色微丝并非特异性的,因为 R250 可以 对多种蛋白质染色。尚宝生物生产的微丝染色液在染色过程中由于微观结构不稳定,有些纤维在光学显微镜下无 法辨认,因此能够看到的纤维主要是由微丝组成的应力纤维。本试剂仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他 用途。 产品组成: 产品名称 5×50ml 储存条件 试剂(A): PBS buffer(10×) 50ml 室温 试剂(B): TM buffer 50ml 室温 试剂(C): M buffer(3×) 50ml 室温 试剂(D): Microfilament fluid 50ml 4℃,避光 试剂(E): R250staining solution 50ml 室温
 
  操作步骤: (一)、动物细胞微丝 1. 取材:在盖玻片上细胞培养,生长密度达 60~70%时细胞面朝上置于称量瓶中。用去离子水稀释 PBS buffer(10 ×)至 1×,用 1×PBS buffer 清洗 1min,重复 1 次。 2. 抽提:弃 PBS buffer,加入 2ml TM buffer,盖上称量瓶盖子,37℃处理 25~30min。 3. 漂洗:弃 TM buffer,用去离子水稀释 M buffer(3×)至 1×,用 1×M buffer 清洗 2min,重复 2 次。 4. 固定:稍微晾干,加入 2ml Microfilament fluid,固定细胞 15~20min。 5. 冲洗:弃 Microfilament fluid,用 1×PBS buffer 轻轻清洗 2min,重复 1 次。 6. 染色:弃 PBS buffer,把盖玻片立于吸水滤纸上吸去边缘水分,加入 2ml R250 staining solution,染色 20~ 25min。 7. 去离子水冲洗染液,滤纸吸干水分,晾干,镜检或树脂封片。 (二)、植物细胞微丝 1. 取材:用去离子水稀释 PBS buffer(10×)至 1×。轻轻撕取约 1cm 洋葱鳞茎内皮,置于预先加入 1×PBS buffer 的称量瓶中,孵育 5~10min,使其下沉。 2. 抽提:弃 PBS buffer,加入 2ml TM buffer,盖上称量瓶盖子,37℃处理 30min。 3. 漂洗:弃 TM buffer,用去离子水稀释 M buffer(3×)至 1×,用 1×M buffer 清洗 3~5min,重复 2 次。 4. 固定:稍微晾干,加入 2ml Microfilament fluid,固定细胞 20~25min。 5. 冲洗:弃 Microfilament fluid,用 1×M buffer 清洗 3~5min,重复 2 次。


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